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      UV檢測中容易出現檢測誤差的幾點情況

       UV檢測是利用物質對光的選擇性吸收進行物質的定性或定量分析的儀器,主要用于物質純度檢查、定量分析、物質結構鑒別等。

      檢測流程:打開電源,檢驗吸收池的成套性,選擇工作波長,選擇測量方式,潤洗比色皿,依次裝入參比溶液和測量溶液,參比溶液于光路中,透射比模式下同時調0和100%;在吸光度模式下,測定測量溶液的吸光度。

      可測量結果總會出現可接受或不可接受的誤差,誤差來源于測量過程的各個方面,主要來源于儀器本身性能和測量條件的選擇兩個方面。

      1、復色光對比耳定律的偏離

       當檢測溶液濃度較小且單色光較純時,可近似認為符合比耳定律。但是精度再高的儀器,即使是雙單色器的紫外可見分光光度計,也只能獲得近乎單色的光,無法獲得純單色光,而復色光就會導致比耳定律的正或負偏離。

      2、雜散光的影響(誤差的主要來源)

      雜散光是指進入檢測器后處于待測波長光譜帶寬范圍外的其他波長組分。

      在定量分析時,一般在吸收峰或其附近處測量樣品吸光度,如果在分析波長處含有雜散光,這時樣品的透光率較小,而雜散光大部分透過,使測量吸光度低于真實吸光度。

      3、儀器噪聲對測量結果的影響

      如果儀器噪聲較大,會掩蓋較小的測量信號,一般用噪音的二倍來表示儀器的靈敏度。

      4、波長和吸光度準確度

      樣品的每一個值都是在一定的波長下測得的,如果波長誤差很大,測出的值肯定不準。

      5、參比溶液和溶劑的選擇

      正確選擇合適的溶劑,對提高分析的準確度起重要作用。為減小溶劑中雜質的影響,應選擇高純度的溶劑;溶劑應不與待測物質發生化學反應;待測物在溶劑中要有一定的溶解度;在測定的波長范圍內,溶劑本身沒有吸收,注意常用溶劑的最短可用波長;當用揮發性大的溶劑時,測量過程中吸收池應加蓋。

      6、測試波長的選擇

       在一般情況下,我們總是選擇最大吸收波長作為測量波長,這樣可以提高靈敏度。而在有些情況下最大吸收峰很尖銳、吸收過大或附近有干擾存在,就不能選最大吸收波長,而必須在保證有一定靈敏度的情況下,選擇吸收曲線中的其它波長進行測定,以消除干擾。

      7、吸光度范圍的選擇

      試樣在不同吸光度時,濃度的相對誤差不同,一般選擇0.2一0.8之間,濃度相對誤差較小,可以通過改變吸收池厚度、檢測波長或待測溶液濃度,使吸光度讀數在適宜范圍內。

      8、狹縫寬度的選擇

      在定量分析時,為了得到足夠的測量信號,應采用較大狹縫。在定性分析時,為了提高分辨率,應采用較小狹縫,以獲得精細的光譜結構。

      9、吸收池的選擇和使用

       在定量測量之前需要對吸收池作校正和配對工作,吸收池不匹配時,對測量產生誤差,吸收池方向不同,透光率亦有差異,測量結果就會有誤差。如透光壁外有溶液存在,要擦干再測,否則將產生誤差。

      10、溫度的選定

      溫度對溶液顏色的深淺和吸光度都有影響,溫度升高,紫外可見分光光度計光譜吸收向短波方向移動。故在繪制標準曲線和測定樣品時,應保持溫度一致,通常在室溫條件下進行。

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